Phenylgalactoside CAS:2818-58-8

انزائم کی سرگرمی پر اثر: Phenylgalactoside عام طور پر انزائم β-galactosidase کی سرگرمی کی پیمائش کے لیے استعمال ہوتا ہے۔جب phenylgalactoside کو β-galactosidase کے ذریعے ہائیڈولائز کیا جاتا ہے، تو یہ p-nitrophenol کو جاری کرتا ہے۔p-nitrophenol کے جمع ہونے کو مقداری طور پر ماپا جا سکتا ہے، جو β-galactosidase کی سرگرمی میں بصیرت فراہم کرتا ہے۔اس اثر کو ایپلی کیشنز میں استعمال کیا جاتا ہے جیسے انزائم اسسیس اور اسکریننگ سسٹم۔

جین ایکسپریشن کا تجزیہ: جین ایکسپریشن کا مطالعہ کرنے کے لیے مالیکیولر بائیولوجی کے تجربات میں فینیلگلیکٹوسائیڈ کو اکثر سبسٹریٹ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے۔lacZ جین، جو کہ β-galactosidase کو انکوڈ کرتا ہے، عام طور پر دلچسپی کے دیگر جینوں کے ریگولیٹری سلسلے کے ساتھ ملایا جاتا ہے۔lacZ جین کا اظہار اور β-galactosidase کے ذریعہ phenylgalactoside کا ہائیڈرولیسس مطالعہ کیے جانے والے ہدف جین کے اظہار کے انداز اور سطح کی نشاندہی کرسکتا ہے۔

اسکریننگ سسٹم: Phenylgalactoside اسکریننگ سسٹم کا ایک اہم جزو ہے جو β-galactosidase سرگرمی کا استعمال کرتا ہے۔ایک وسیع پیمانے پر مشہور مثال نیلی سفید اسکریننگ کا طریقہ ہے، جو سالماتی حیاتیات کے تجربات میں دوبارہ پیدا ہونے والے یا تبدیل شدہ خلیوں کی شناخت کے لیے استعمال ہوتا ہے۔وہ کالونیاں جنہوں نے کامیابی کے ساتھ دوبارہ پیدا ہونے والے ڈی این اے کو لیا ہے یا جنیاتی دوبارہ ملاپ سے گزر چکے ہیں وہ β-galactosidase کا اظہار کریں گے، جس کے نتیجے میں phenylgalactoside کے ہائیڈرولیسس اور نیلے رنگ کی تشکیل ہوتی ہے۔

پروٹین پیوریفیکیشن: بعض صورتوں میں، فینیلگلیکٹوسائیڈ کو ان پروٹینوں کو پاک کرنے کے لیے جو خاص طور پر β-galactosidase سے منسلک ہوتے ہیں یا چالو ہوتے ہیں، affinity chromatography کے لیے ligand کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔دلچسپی کے پروٹین میں ایک وابستگی ٹیگ یا فیوژن ٹیگ ہوسکتا ہے جس میں β-galactosidase-binding ڈومین ہوتا ہے۔پروٹین مکسچر کو ایک کالم کے ذریعے غیر متحرک فینیلگلیکٹوسائیڈ کے ذریعے منتقل کرنے سے، مطلوبہ پروٹین کو منتخب طور پر برقرار رکھا جا سکتا ہے اور بعد میں خارج کیا جا سکتا ہے۔