IPTG CAS:367-93-1 مینوفیکچرر قیمت
Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) لییکٹوز کا ایک مصنوعی اینالاگ ہے جو عام طور پر سالماتی حیاتیات کی تحقیق اور بائیو ٹیکنالوجی ایپلی کیشنز میں استعمال ہوتا ہے۔آئی پی ٹی جی بنیادی طور پر بیکٹیریل نظاموں میں جین کے اظہار کو دلانے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، جہاں یہ ہدف جینوں کی نقل کو شروع کرنے کے لیے مالیکیولر ٹرگر کے طور پر کام کرتا ہے۔
جب گروتھ میڈیم میں شامل کیا جاتا ہے تو، آئی پی ٹی جی کو بیکٹیریا لے جاتا ہے اور یہ لاکھ ریپریسر پروٹین سے منسلک ہو سکتا ہے، جس سے اسے لاک اوپیرون کی سرگرمی کو روکنے سے روکا جا سکتا ہے۔لاک اوپیرون لییکٹوز میٹابولزم میں شامل جینوں کا ایک جھرمٹ ہے، اور جب ریپریسر پروٹین کو ہٹا دیا جاتا ہے، تو جین ظاہر ہوتے ہیں۔
IPTG اکثر lacUV5 اتپریورتی پروموٹر کے ساتھ مل کر استعمال کیا جاتا ہے، جو lac پروموٹر کا جزوی طور پر فعال ورژن ہے۔آئی پی ٹی جی انڈکشن کو اس اتپریورتی پروموٹر کے ساتھ ملا کر، محققین جین کے اظہار کی اعلی سطح حاصل کر سکتے ہیں۔یہ طہارت یا دیگر بہاو ایپلی کیشنز کے لیے بڑی مقدار میں پروٹین کی پیداوار کی اجازت دیتا ہے۔
جین کے اظہار کے علاوہ، IPTG کو نیلے/سفید اسکریننگ اسسیس میں بھی کثرت سے استعمال کیا جاتا ہے۔اس تکنیک میں، lacZ جین کو عام طور پر دلچسپی کے جین میں ملایا جاتا ہے، اور بیکٹیریا جو اس فیوژن جین کا کامیابی سے اظہار کرتے ہیں ایک فعال β-galactosidase انزائم تیار کریں گے۔جب آئی پی ٹی جی کو کروموجینک سبسٹریٹ کے ساتھ شامل کیا جاتا ہے جیسے کہ X-gal، بیکٹیریا جو فیوژن جین کا اظہار کرتے ہیں β-galactosidase کی سرگرمی کی وجہ سے نیلے ہو جاتے ہیں۔یہ دوبارہ پیدا ہونے والے تناؤ کی شناخت اور انتخاب کی اجازت دیتا ہے جنہوں نے دلچسپی کے جین کو کامیابی کے ساتھ مربوط کیا ہے۔
جین کے اظہار کی شمولیت: IPTG عام طور پر بیکٹیریل نظاموں میں ہدف جین کے اظہار کو دلانے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔یہ قدرتی inducer lactose کی نقل کرتا ہے اور lac repressor پروٹین سے منسلک ہوتا ہے، اسے lac operon کو روکنے سے روکتا ہے۔یہ مطلوبہ جینوں کی نقل اور اظہار کی اجازت دیتا ہے۔
پروٹین ایکسپریشن اور پیوریفیکیشن: آئی پی ٹی جی انڈکشن کا استعمال اکثر مختلف مقاصد کے لیے ریکومبینینٹ پروٹینز کی بڑی مقدار پیدا کرنے کے لیے کیا جاتا ہے، جیسے بائیو کیمیکل اسٹڈیز، علاج کی تیاری، یا ساختی تجزیہ۔مناسب اظہار ویکٹر اور آئی پی ٹی جی انڈکشن کا استعمال کرتے ہوئے، محققین بیکٹیریل میزبانوں میں ہدف پروٹین کی پیداوار کی اعلی سطح حاصل کر سکتے ہیں۔
نیلی/سفید اسکریننگ: IPTG کو اکثر lacZ جین اور ایک کروموجینک سبسٹریٹ کے ساتھ ملا کر استعمال کیا جاتا ہے، جیسے کہ X-gal، نیلی/سفید اسکریننگ اسسیس کے لیے۔lacZ جین کو عام طور پر دلچسپی کے جین میں ملایا جاتا ہے، اور بیکٹیریا جو اس فیوژن جین کا کامیابی سے اظہار کرتے ہیں ایک فعال β-galactosidase انزائم تیار کریں گے۔جب آئی پی ٹی جی اور کروموجینک سبسٹریٹ کو شامل کیا جاتا ہے تو، فیوژن جین کو ظاہر کرنے والے دوبارہ پیدا ہونے والے تناؤ نیلے ہو جاتے ہیں، جس سے شناخت اور انتخاب آسان ہو جاتا ہے۔
جین ریگولیشن کا مطالعہ: آئی پی ٹی جی انڈکشن کو عام طور پر تحقیق میں جینز اور اوپیرون کے ریگولیشن کا مطالعہ کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، خاص طور پر لاکھ اوپیرون۔آئی پی ٹی جی کے ارتکاز میں ہیرا پھیری کرکے اور لاکھ اوپیرون اجزاء کے اظہار کی نگرانی کرکے، محققین جین ریگولیشن کے طریقہ کار اور مختلف عوامل یا تغیرات کے کردار کی چھان بین کر سکتے ہیں۔
جین ایکسپریشن سسٹمز: آئی پی ٹی جی کئی جین ایکسپریشن سسٹمز میں ایک اہم جزو ہے، جیسے کہ T7 پروموٹر پر مبنی نظام۔ان نظاموں میں، لاکھ پروموٹر اکثر T7 RNA پولیمریز کے اظہار کو چلانے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، جو بدلے میں، T7 پروموٹر کی ترتیب کے کنٹرول میں ہدف کے جینوں کو نقل کرتا ہے۔IPTG T7 RNA پولیمریز کے اظہار کو دلانے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، جس کے نتیجے میں ہدف جین کے اظہار کو چالو کیا جاتا ہے۔
کمپوزیشن | C9H18O5S |
پرکھ | 99% |
ظہور | سفید پاوڈر |
CAS نمبر | 367-93-1 |
پیکنگ | چھوٹے اور بڑے |
شیلف زندگی | 2 سال |
ذخیرہ | ٹھنڈی اور خشک جگہ پر اسٹور کریں۔ |
تصدیق | آئی ایس او |